白菜胚体愈伤组织怎么做原生质体?

来源:发财农业网时间:2023-11-14 15:46:28编辑:Seiyanes 当前位置:发财农业网 > 种植 > 蔬菜 > 白菜 > 手机阅读

选择生长健康、无病害的白菜植株。70%乙醇、次氯酸钠等,用于表面消毒植物材料。

制备白菜的愈伤组织原生质体通常涉及一系列步骤,主要包括表面消毒、愈伤组织的培养和酶解等过程。以下是一个一般的操作流程:
 
白菜胚体愈伤组织怎么做原生质体?
 

材料准备:

 

1. 白菜胚体: 

 
选择生长健康、无病害的白菜植株。
 

2. 表面消毒剂: 

 
70%乙醇、次氯酸钠等,用于表面消毒植物材料。
 

3. 培养基: 

 
含有植物生长激素的培养基,如Murashige and Skoog培养基(MS培养基)。
 

4. 愈伤组织培养条件: 

 
具体培养条件根据实验设计和白菜品种而定。
 

5. 酶液: 

 
植物酶解酶、纤维素酶等,用于酶解植物细胞壁,释放原生质体。
 

6. 实验室用具: 

 
显微镜、吸管、移液器、培养皿、滤纸等。
 
白菜胚体愈伤组织怎么做原生质体?
 

步骤:

 

1. 表面消毒:

 
   将白菜胚体在流动水下清洗,去除表面的尘土。
 
   将白菜胚体浸泡在70%乙醇或次氯酸钠等表面消毒剂中,进行表面消毒。消毒时间通常在几分钟到十几分钟之间,具体取决于消毒剂的浓度和植物材料的特性。
 

2. 剪切和培养:

 
   将表面消毒后的白菜胚体剪成小段。
 
   将这些小段培养在含有植物生长激素的培养基中,提供适当的温度和光照条件。培养时间根据实验设计和研究目的而定,通常是数天到数周。
 

3. 收获愈伤组织:

 
   当愈伤组织形成并达到适当的大小时,收获愈伤组织用于后续的实验。
 

4. 酶解和原生质体制备:

 
   将收获的愈伤组织放入含有植物酶解酶、纤维素酶等的酶液中,进行酶解。酶解时间和温度根据实验需求而定,通常需要在无菌条件下进行操作。
 
   过滤酶解后的混合物,获取含有原生质体的悬浮液。
 

5. 培养原生质体:

 
   将原生质体悬浮液接种到含有植物生长激素的培养基中,提供适当的生长条件。
 
这是一个一般性的步骤概述,具体的实验条件和步骤可能因实验目的、植物品种和培养条件的不同而有所不同。在进行实验之前,请确保阅读相关的文献和方法论,以了解适用于您研究的特定条件。同时,进行实验时,严格遵循无菌技术,以防止外部微生物的污染。
 

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